T7转录酶法RNA制备试剂盒 | |
产品编号:R5210 | |
产品规格:25T | |
产品价格:2850 | |
说明: 本试剂盒用于体外转录产生带有FITC或Cy3或Cy5等修饰RNA探针,获得的RNA探针适合原位杂交,Northern blot杂交,RNA蛋白相互作用。可以适当渗入FITC/Cy3/Cy5/DIG/Bio等,标记效率已优化。修饰后的RNA探针可通过光谱仪检测。 组成: Cat. No Product Name Size Number Store T7 RNA 聚合酶Buffer(10X) 50ul 1 -20℃ T7 RNA聚合酶 50ul 1 -20℃ NTP Mix(Cy5) 200ul 1 -20℃ DNA质控模板 5ul 1 -20℃ RNase Inhibitor 25ul 1 -20℃ 无核酸酶水 1ml 1 -20℃ DNA模板获得: DNA模板可以是质粒DNA、寡核苷酸退火双链、PCR产物或cDNA等等。 DNA模板必须是线性的,包含转录起始位点的T7 RNA聚合酶启动子序列。 实验操作: (1)模板准备: 1)添加T7 启动子序列,引物扩增目的基因片段(我公司可以提供)。 2)寡核苷酸退火提供PCR片段(我公司可以提供)。 3)cDNA合成的制备的模板。 4)务必将需要带有T7启动子序列引入的基因组序列。 (2)戴好手套,口罩,冰上操作,按以下顺序配制反应混合液; 10×Buffer 2ul NTP Mix(Cy5 or FITC or Cy3) 8ul DNA模板 0.2-1ug RNase Inhibitor 1ul T7 RNA聚合酶 2ul 无核酸酶水 Xul,Add to 20ul Total 20ul (3)用枪头轻轻混匀,在37°C条件下孵育1-2小时;对小短片段,需要孵育4小时; (4)胶回收纯化合成的RNA、或乙醇沉淀纯化的RNA,可凝胶电泳检测转录产物; (5)荧光效率标记和浓度可以通过光谱仪或核酸检测仪。 |