蛋白银染试剂 | |
产品编号:S-1153 | |
产品规格:25ml | |
产品价格:200 | |
蛋白质银染检测试剂盒 原理: 银染是比考马斯亮蓝染色更灵敏的一种,它是通过银离子(Ag+)在蛋白质上某些基团被还原成金属银形成黑色来指示蛋白区带的。银染可以直接进行也可以在主要的蛋白条带通过考马斯亮蓝染色分辨,而细小的考马斯亮蓝染色检测不到的蛋白带色后进行凝胶银染检测。银染的灵敏度比考马斯亮蓝染色高100倍,可以检测低于10 ng的蛋白质。银染法分很多种,包括:二胺银染法、无二胺银染法、照相银染法、负片银染法和正片银染法,这里介绍的是一种常用无二胺银染法。 1.增敏溶液(10X) 25ml 2.1%硝酸银溶液(10X) 25ml 3.显影液(10X) 50ml 操作步骤: 1.固定:将电泳后凝胶放入固定液50%甲醇或50%乙醇+10%乙酸固定液,置摇床,缓慢振荡浸泡30-60分钟。 2.洗涤:用去离子水漂洗30分钟,至少更换3次。 3.增敏:10X稀释成为1X,将经过固定的胶片置此溶液中平缓摇动,染色15-20分钟。 4.洗涤:用去离子水漂洗染色后的胶片,共3次,每次1分钟。 5.染色:将1&硝酸银10X稀释为1X,胶片置此溶液中平缓摇动,染色20-30分钟。 6.显色:将显影液用去离子水稀释成1×液体,用它漂洗一次,将胶浸入,观察到合适的染色为止。 7.洗涤:用去离子水漂洗终止后的胶片,共3次,每次1分钟。 8.如果蛋白质染色太深,用水洗涤后,然后用40%甲醇-10%乙酸混合液漂洗。 9.1%柠檬酸固定(可以不用此步骤),照相、保存显色出的蛋白质条带并记录。
注意事项: 1.室温避光保存。 2.请严格按照产品使用说明书进行操作。 3.请使用去离子水或纯水来完成实验。 |